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ProteanFect:實(shí)現(xiàn)干細(xì)胞內(nèi)Prime Editor等多種基因編輯器高效遞送

更新時(shí)間:2025-04-11

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干細(xì)胞因具備自我更新與多向分化潛能,在再生醫(yī)學(xué)、疾病治療和精準(zhǔn)醫(yī)療等領(lǐng)域具有重要科研與應(yīng)用價(jià)值。然而,由于其獨(dú)·特的生理特性(如靜息狀態(tài)、高效外排機(jī)制和特殊膜結(jié)構(gòu)等),干細(xì)胞的基因編輯與核酸遞送一直面臨效率低、重復(fù)性差、細(xì)胞損傷大等技術(shù)瓶頸。近日,西湖大學(xué)聯(lián)合西湖凝聚體研究團(tuán)隊(duì),成功開(kāi)發(fā)出基于內(nèi)源蛋白凝聚體的創(chuàng)新遞送平臺(tái)——ProteanFect™。該產(chǎn)品能夠高效轉(zhuǎn)染包括 iPSCs、ESCs、MSCs、CD34? 造血干細(xì)胞在內(nèi)的多種難轉(zhuǎn)染干細(xì)胞,不僅提升基因遞送效率,同時(shí)有效保持干細(xì)胞的干性與功能完整性。

ProteanFect 與傳統(tǒng)方法相比具有顯著優(yōu)勢(shì)

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iPSCs:高效基因編輯 + 優(yōu)異細(xì)胞狀態(tài)

來(lái)自斯坦福大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)利用 ProteanFect 成功遞送 PE7 先導(dǎo)編輯系統(tǒng)至 PBMC 衍生的 iPSC,并實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)點(diǎn)突變c.757G>T),進(jìn)一步驗(yàn)證了該試劑在難轉(zhuǎn)染干細(xì)胞中的高效基因編輯能力。

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圖1. 利用ProteanFect遞送PE7系統(tǒng)進(jìn)入iPSCs進(jìn)行堿基編輯

此外,研究團(tuán)隊(duì)還表示,ProteanFect 可謂“國(guó)貨之光",其在 iPSC 轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞狀態(tài)“特別好",基本沒(méi)有死細(xì)胞",且操作更加簡(jiǎn)便,成功解決了干細(xì)胞轉(zhuǎn)染中效率低和毒性高的難題。

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CD34? 造血干細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率達(dá) 72.3%

此外,ProteanFect 在 CD34+ 造血干細(xì)胞中也展現(xiàn)了卓·越性能:不僅實(shí)現(xiàn)了高達(dá) 72.3% 的轉(zhuǎn)染效率,同時(shí)不影響細(xì)胞的正常分化。這一數(shù)據(jù)表明,該技術(shù)在提升基因遞送效率的同時(shí),能夠有效維持干細(xì)胞的生理功能。

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攻克 MSC 轉(zhuǎn)染難題

北醫(yī)三院的研究團(tuán)隊(duì)使用 ProteanFect Max 完成了 UCMSC 的懸浮狀態(tài)轉(zhuǎn)染mRNA-GFP 轉(zhuǎn)染效率達(dá)到 70–80%。

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基于內(nèi)源蛋白凝聚體的創(chuàng)新遞送機(jī)制

ProteanFect 技術(shù)基于蛋白質(zhì)-核酸相互作用的生物物理學(xué)原理,利用內(nèi)源蛋白與核酸在特定條件下自組裝形成納米級(jí)復(fù)合物。這些復(fù)合物具有特定的尺寸和表面電荷特性,能通過(guò)非受體依賴(lài)的內(nèi)吞途徑高效穿透干細(xì)胞膜。

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與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方法相比,ProteanFect 在干細(xì)胞遞送中的獨(dú)·特優(yōu)勢(shì):

1. 避免細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng):轉(zhuǎn)染過(guò)程不激活細(xì)胞應(yīng)激通路;

2. 不影響干性:保持干細(xì)胞的增殖能力和分化潛能完整性;

3. 內(nèi)源蛋白遞送:通過(guò)特異性?xún)?nèi)吞途徑進(jìn)入細(xì)胞,同時(shí)天然降解其余蛋白;

4. 操作簡(jiǎn)便:無(wú)需專(zhuān)業(yè)設(shè)備,適用于日常實(shí)驗(yàn)和高通量應(yīng)用。

ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒產(chǎn)品信息

基于上述實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的凝聚體遞送機(jī)制,西湖凝聚體開(kāi)發(fā)了 ProteanFect™ 系列轉(zhuǎn)染試劑盒:

轉(zhuǎn)染試劑盒

ProteanFect™ Max 轉(zhuǎn)染試劑盒PT02):適用于iPSCs、ESCs、MSCs、CD34+ 等干細(xì)胞以及原代 T 細(xì)胞和多種難轉(zhuǎn)細(xì)胞系的 mRNA、siRNA 和質(zhì)粒遞送。


基因編輯應(yīng)用

ProteanFect™ CRISPRMax Cas9 轉(zhuǎn)染試劑盒PT05):適用于 CRISPR-Cas9、Base Editor、Prime Editor 等基因編輯系統(tǒng)在干細(xì)胞中的應(yīng)用


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